什么是轉染

轉染是通過病毒方法以外的方式將 DNA 或 RNA 人工引入哺乳動物細胞的過程。 大多數(shù)時候，感興趣的 DNA 片段被連接到一個載體中，該載體可以是質粒、粘粒、BAC（細菌人工染色體）、YAC（酵母人工染色體）或 HAC（人類人工染色體）。 最常見的轉染方法是化學介導的轉染，如磷酸鈣共沉淀、脂質體和物理方法，如電穿孔、基因槍技術和顯微注射。

圖 1：人類卵子的顯微注射

根據轉移的 DNA 在細胞內存在的時間長短，可以識別兩種類型的轉染。 它們是瞬時轉染和穩(wěn)定轉染。 在瞬時轉染中，引入的 DNA 在細胞內存在的時間有限，而在穩(wěn)定轉染中，引入的 DNA 在細胞內持續(xù)存在很長一段時間，因為它已整合到基因組中。

什么是轉化

轉化是植物、酵母、細菌細胞的感受態(tài)細胞攝取外來DNA的自然過程。 它通過在細胞膜上形成孔隙來誘導細胞具有能力，裸露的 DNA 通過這些孔隙進入細胞。

圖 2：細菌轉化

通過轉化進行基因轉移的三種方法是化學轉化、電穿孔和粒子轟擊。 轉化的一般方法是化學轉化，其中用氯化鈣處理宿主細胞使細胞更容易吸收外源 DNA。 這個細胞階段稱為感受態(tài)細胞。 然后，通過熱休克在細胞膜上暫時產生孔隙。 在電穿孔中，通過電擊使細胞具有活性。 粒子轟擊是將 DNA 轉移到植物細胞中的一般方法，其中 DNA 包被的金或鎢通過基因槍物理強制進入細胞。

轉染與轉化的區(qū)別

定義：轉染是將裸核酸或純化核酸故意引入真核細胞的過程，而轉化是指通過細胞膜從周圍環(huán)境中直接攝取和摻入外源遺傳物質。

細胞類型：轉染將外源 DNA 引入哺乳動物細胞，而轉化將外源 DNA 引入植物、酵母或細菌細胞。

引入方法：轉染使用磷酸鈣共沉淀、脂質體、電穿孔、基因槍技術和顯微注射進行基因轉移，而轉化使用化學轉化、電穿孔和粒子轟擊。

結論

轉染是將外源 DNA 引入哺乳動物細胞，而轉化是將外源 DNA 引入細菌、酵母或植物細胞。這兩種方法都不依賴于基因轉移的病毒方法。轉染和轉化之間的主要區(qū)別是基因轉移到的細胞類型。