質(zhì)譜不僅可以用于蛋白質(zhì)泛素化的鑒定，也可以用于泛素化蛋白組的定量。百泰派克生物科技提供基于質(zhì)譜的泛素化定量蛋白組學(xué)研究服務(wù)。

定量泛素化蛋白組分析

定量泛素化蛋白組分析，是在組學(xué)的水平上對泛素化蛋白質(zhì)進(jìn)行定量分析。泛素是一個(gè)由76個(gè)氨基酸殘基組成的非常保守的多肽，能在酶的作用下與細(xì)胞內(nèi)靶蛋白上的一個(gè)或多個(gè)賴氨酸殘基發(fā)生共價(jià)連接。泛素化蛋白質(zhì)指連接有泛素的蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)泛素化參與了多種生命活動，與疾病的發(fā)病機(jī)理也有關(guān)，分析泛素化蛋白質(zhì)組有助于生命活動和疾病發(fā)生的研究。

定量泛素化蛋白質(zhì)組分析質(zhì)譜

利用質(zhì)譜的方法可以實(shí)現(xiàn)泛素化蛋白質(zhì)組的定量分析。由于泛素化蛋白質(zhì)在生物樣本中含量低且動態(tài)范圍廣，質(zhì)譜分析前一般需要對泛素化蛋白和肽段進(jìn)行富集以提高其豐度，然后再利用傳統(tǒng)的定量蛋白組分析手段對富集得到的泛素化肽段樣品進(jìn)行定量分析。在基于質(zhì)譜的泛素化定量蛋白組學(xué)研究中，首先要對泛素化的蛋白進(jìn)行胰酶消化，其賴氨酸的修飾位點(diǎn)上會產(chǎn)生兩個(gè)甘氨酸的殘基，利用針對該殘基的試劑盒對泛素化肽段進(jìn)行特異性的富集。之后使用HPLC對樣品進(jìn)行預(yù)分離，再使用抗特殊殘基結(jié)構(gòu)的抗體進(jìn)行泛素化肽段的富集，可以極大地提高泛素化蛋白的鑒定量，從而更好地實(shí)現(xiàn)泛素化蛋白組的定量。