1.有表達(dá)：在疾病中有表達(dá)差異。

qPCR：檢測(cè)mRNA表達(dá)水平

WB：檢測(cè)蛋白水平變化。

需用到測(cè)序：設(shè)計(jì)引物、克隆基因（用于過表達(dá)）、設(shè)計(jì)siRNA、shRNA。

檢索基因：三個(gè)數(shù)據(jù)庫(kù)

從GENE數(shù)據(jù)庫(kù)找到基因可以鏈接到nucleotide里的mRNA

腺病毒：主要用于做過表達(dá)，做RNA干擾時(shí)免疫源性較強(qiáng)，不推薦。

慢病毒：本質(zhì)是逆轉(zhuǎn)錄病毒；尤其適合做RNAi，也可用于CRISPR；表達(dá)短的插入片段；理論上整合到基因組可長(zhǎng)期穩(wěn)定表達(dá)；過表達(dá)上有局限性，是一個(gè)沉默載體。

腺相關(guān)病毒：過表達(dá)載體。

做RNAi干擾時(shí)：shRNA 是siRNA的前體。前者更穩(wěn)定

陰性對(duì)照：

過表達(dá)實(shí)驗(yàn)里，陰性對(duì)照是空載體；

RNAi里，是一段打亂的序列，一段無效的siRNA

拯救實(shí)驗(yàn)：能很好的消除假陽(yáng)性；在一個(gè)細(xì)胞里進(jìn)行正反兩次驗(yàn)證。

單變量拯救實(shí)驗(yàn)：先把基因用siRNA沉默掉，然后把穩(wěn)定沉默基因的細(xì)胞再分成兩組，一組轉(zhuǎn)空載體對(duì)照，另一組轉(zhuǎn)入過表達(dá)載體，及過表達(dá)和沉默（細(xì)胞表型功能）。再在一個(gè)細(xì)胞里先沉默后過表達(dá)（反之亦然），將其表型與沉默和過表達(dá)的表型做對(duì)比。

配圖：

fig.1：組織和細(xì)胞表達(dá)的數(shù)據(jù)。

fig.2：細(xì)胞水平（in vitro）功能研究。a.提供過表達(dá)或者沉默有效的數(shù)據(jù)；其余的應(yīng)該是用來檢測(cè)表型功能的實(shí)驗(yàn)：如增值和細(xì)胞周期的表型（增值：細(xì)胞生長(zhǎng)曲線；細(xì)胞周期：流式），一個(gè)表型用多個(gè)不同原理實(shí)驗(yàn)進(jìn)行佐證。

fig.3:體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)in vivo水平表型驗(yàn)證。