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翻譯后修飾(PTMs)解決方案——Signal-Seeker kit

2021-05-14 16:26 作者:艾美捷  | 我要投稿

翻譯后修飾(PTMs)是對蛋白質(zhì)的動態(tài)、嚴(yán)格調(diào)節(jié)的改變,它通過調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)、空間定位和互作、從而控制其功能,PTMs主要包括磷酸化、甲基化、乙酰化(Ac)、泛素化(Ub)、SUMO1或2/3等方式,但還有許多其它的,PTMs的錯誤調(diào)節(jié)與癌癥、心力衰竭、神經(jīng)和代謝性疾病等的進(jìn)展有關(guān)。

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蛋白質(zhì)發(fā)生PTM后,會顯著改變蛋白的理化及構(gòu)象,從而直接改變蛋白的結(jié)合能力與功能。因此,即使蛋白的表達(dá)水平?jīng)]有改變,但如果翻譯后修飾的狀態(tài)發(fā)生改變,蛋白的功能也會顯著變化。zui終,PTM實(shí)現(xiàn)了蛋白質(zhì)功能的指數(shù)級擴(kuò)增。

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PTM對蛋白功能影響是多樣性的,表現(xiàn)在以下三個方面:(1)同一蛋白質(zhì),即使只發(fā)生一種類型的修飾,也會賦予其多種功能;(2)同一個蛋白的同一種翻譯后修飾,如果發(fā)生在不同的氨基酸上,其功能也不同;(3)同一蛋白還可能具有不同的修飾,其功能和參與的生物過程就更為復(fù)雜。下圖以intermediate filament protein(IF蛋白)為例:

NatureReviews Molecular Cell Biology 15, 163–177 (2014)


蛋白修飾及功能的多樣性是維持機(jī)體復(fù)雜精準(zhǔn)調(diào)控的基礎(chǔ),但同時也給研究PTM的科研人員的研究造成了很多的困擾,為什么蛋白質(zhì)翻譯后修飾的鑒定難度要遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于未發(fā)生修飾的蛋白質(zhì)的鑒定了,主要有以下幾點(diǎn):

1.發(fā)生翻譯后修飾的蛋白質(zhì)樣本量相對較少

2.發(fā)生修飾時形成的共價鍵非常不穩(wěn)定,且處于動態(tài)變化中

3.修飾與未修飾的蛋白及多種修飾形式的蛋白?;旌洗嬖?/p>

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Signal-Seeker? kit用于分析各種蛋白翻譯后修飾的情況:如賴氨酸乙?;⒎核鼗?、SUMO化、磷酸化等修飾的鑒定及各種修飾的上調(diào)下調(diào)表達(dá)。使用親和磁珠從任何給定的細(xì)胞或組織裂解液中提取并富集修飾蛋白。然后通過標(biāo)準(zhǔn)的Western blot程序分析濃縮蛋白群,zui終用戶使用自身的抗體檢測所需的修飾蛋白。

?文章來源:艾美捷科技


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