慢病毒感染注意事項
1. 進行病毒操作時最好使用專用生物安全柜，避免污染。
3. 在轉染后，如果目的細胞系GFP熒光強度弱，可觀察293T平行對照組熒光強度，如果293T熒光強度也弱，需要考慮病毒液本身的問題，如果293T熒光強度正常，就需要考慮是不是目的細胞系屬于難轉染細胞系等其他原因。
4.在轉染過程中常常遇到加入病毒液后或者加入Puromycin篩選后細胞狀態(tài)極差的情況，這個時候細胞通常比較脆弱，在已經(jīng)確定好病毒液的量或者Puromycin篩選濃度時，多考慮是不是在轉染時細胞本身狀態(tài)不夠好（比如傳多代的細胞會難轉染的情況）。
5.如果加Puromycin后細胞死亡較多，需要及時換液，以防死細胞釋放的有害物質影響具有抗性的細胞生長。
6.像HepG2細胞具有聚集生長的特性，如果加Puromycin后死亡的細胞較多，剩下的HepG2細胞比較稀松，細胞也很難長起來。

特殊細胞的感染注意事項
1、懸浮細胞
感染懸浮或半懸浮細胞，建議通過平角離心轉染法，先重懸細胞，然后將適量的病毒液加入細胞培養(yǎng)皿后， 封好口，放入平角離心機，低速（1200g）離心1 h，然后放入培養(yǎng)箱中正常培養(yǎng)即可。若由于實驗條件有限，沒有平角離心機，可用離心管代替，將細胞吹打吸入離心管中，進行低速離心，去掉大部分上清，然后加入適量的病毒液，室溫放置15 min（盡量不要超過30 min），然后將細胞和病毒液同時吸出轉入培養(yǎng)皿中繼續(xù)病毒感染過夜即可。

2、極難感染的細胞
對于極難感染的細胞，如DC（樹突狀細胞）等，可采用多次感染的方法，即感染24 h后，更換新鮮病毒進行二次感染，可顯著提升感染效率。
注：多次感染的時間間隔需要根據(jù)細胞狀態(tài)來調整，要保證每次感染前細胞處于較良好狀態(tài)。

3、傳代能力較差的原代細胞
對于一些傳代能力較差的原代細胞，比如BMSC等，建議采用滴度更高的腺病毒進行感染。