Kamiya艾美捷抗酒石酸酸性磷酸酶TRAP染色試劑盒原理：

K-ASSAY?TRAP染色試劑盒用于破骨細(xì)胞中抗酒石酸酸性磷酸酶的染色。骨量由成骨細(xì)胞活性和破骨細(xì)胞活性之間的平衡控制。堿性磷酸酶和抗酒石酸酸性磷酸酶被用作成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞的標(biāo)志物。僅供研究使用，不得用于診斷程序。。 ?

?

Kamiya艾美捷TRAP Staining Kit抗酒石酸酸性磷酸酶TRAP染色試劑盒組件：

固定劑，10%福爾馬林，中性緩沖液（試劑1）1瓶，60毫升

含酒石酸鹽的緩沖液，50 mM，pH 5.0（試劑2）1瓶，50 mL

顯色底物（試劑3）10瓶，3mg/瓶

試劑盒尺寸：足夠的試劑用于染色10 x 96孔板。

?

注意事項(xiàng)：

1.開始測定前仔細(xì)閱讀說明。

2.本套件僅供研究使用，不適用于人類或診斷用途。

3.非常小心地確保本產(chǎn)品的質(zhì)量和可靠性。但是，有可能在

在某些情況下，由于高水平的干擾因素，可能會(huì)獲得異常結(jié)果。

?

協(xié)議：

染色程序（96孔板）

1.取出培養(yǎng)基。用100μlPBS洗滌每個(gè)孔一次。

2.向每個(gè)孔中加入50μL固定劑（試劑1）并在室溫下固定5分鐘。

3.用250μldH2O洗滌每個(gè)孔3次。

4.用5ml含酒石酸鹽的緩沖液（試劑2）溶解1小瓶顯色底物（試劑3）。

5.每孔加入50μL顯色底物。

6.在37°C孵育20至60分鐘（只有破骨細(xì)胞染色）。

7.當(dāng)獲得最佳顏色條件時(shí)，用dH2O水洗滌。（過度孵化會(huì)導(dǎo)致降水。沉淀開始前停止反應(yīng)。）

?

Kamiya艾美捷抗酒石酸酸性磷酸酶TRAP染色試劑盒培養(yǎng)上清液中TRAP的定性觀察：

1.用5ml含酒石酸鹽的緩沖液（試劑2）溶解1小瓶顯色底物（試劑3）。

2.將30μL/孔的培養(yǎng)上清液分配到96孔板中并加入170μL/孔的顯色劑

上面制備的含底物/酒石酸鹽的緩沖液。

3.在37℃孵育3小時(shí)。

4.在540nm處讀取酶標(biāo)儀。

?

Kamiya艾美捷抗酒石酸酸性磷酸酶TRAP染色試劑盒文章發(fā)表：

Sherlock, Jonathan P., et al. "IL-23 induces spondyloarthropathy by acting on ROR-γt+ CD3+ CD4? CD8? entheseal resident T cells."Nature medicine18.7 (2012): 1069-1076.

Kim, Jinkoo, et al. "Erythropoietin mediated bone formation is regulated by mTOR signaling."Journal of cellular biochemistry113.(2012): 220-228.