活性氧檢測分析：總ROS熒光法檢測試劑盒
活性氧（ROS）是生物有氧代謝過程中的副產(chǎn)品，包括氧離子，過氧化物和含氧自由基等。下面給大家介紹一下活性氧檢測工具。
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Cell Meter檢測試劑盒是一類用于檢測細胞功能的系列工具，包括細胞活性、細胞毒性、細胞凋亡、細胞膜電位以及細胞周期等方面的指標。每種檢測方案均能提供不同熒光顏色的檢測方案。這些高效的檢測方案為從多角度研究細胞功能活動提供了一種十分有效的方法?；钚匝醴肿樱≧OS）是氧正常代謝過程的固有副產(chǎn)品，在細胞信號及轉(zhuǎn)導過程中扮演著重要的角色。然而，在氧化應激階段，ROS水平顯著增加。ROS的積聚導致細胞結(jié)構的重大破壞。氧化應激通常在心血管疾病，糖尿病，骨質(zhì)疏松，中風，炎癥以及許多神經(jīng)變性疾病和癌癥中被被發(fā)現(xiàn)。ROS的測定能幫助我們理解氧化應激如何調(diào)節(jié)改變的胞內(nèi)途徑。
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艾美捷總ROS檢測試劑/試劑盒可以檢測活細胞中總的ROS，它與ROS反應時，會產(chǎn)生熒光。
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圖1.?用Cell Meter?熒光法細胞內(nèi)總ROS活性測定試劑盒（cat#?AAT-22900）檢測HeLa細胞中的ROS。將HeLa細胞以15,000個細胞/ 90 uL /孔在Costar黑色/透明底部96孔板中過夜接種。將細胞未經(jīng)處理（對照）或在37°C下用1 mM H2O2或100 uM叔丁基氫過氧化物（TBHP）處理30分鐘。加入ROS Brite 670工作溶液（100 uL /孔），并在5％CO2和37°C的培養(yǎng)箱中孵育1小時。使用FlexStation（Molecular Devices）以底部讀取模式在Ex / Em = 650/675 nm（cut off= 665 nm）處檢測熒光信號。
圖2.?在Costar黑色/透明底部96孔板中，用Cell Meter?熒光法細胞內(nèi)總ROS活性測定試劑盒染色的Hela細胞圖像。A：未經(jīng)處理的對照細胞。?B：細胞在染色前用100 uM氫過氧化叔丁基（TBHP）處理30分鐘。
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圖3. ROS Brite 700對PBS緩沖液（pH 7.2）中不同活性氧的熒光響應。用Ex / Em?＝?670 / 700nm測量熒光強度。
