Ⅰ型糖尿?。═ype1diabetes，T1D）是由自身反應(yīng)性T細胞介導的器官特異性自身免疫病，自身反應(yīng)性CD8+CTL通過其T細胞抗原受體（TCR）特異性識別胰島β細胞表面MHC1類分子自身抗原肽復(fù)合物直接破壞B細胞。有核細胞產(chǎn)生的MHC類分子相關(guān)的總和稱為MHC1相關(guān)免疫肽組（MIP），其組成受細胞內(nèi)外刺激因素的精密調(diào)控，該過程中出現(xiàn)新的自身抗原肽可能成為特定狀態(tài)下CTL免疫耐受被打破的重要機制。

胰島β細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)系統(tǒng)發(fā)達，環(huán)境因素如病毒感染、炎癥、高糖等可以干擾B細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的正常功能，引起持續(xù)性病理性內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激（ERS）。研究表明ERS是T1D早期胰島重要病理特征之一，與T1D發(fā)生發(fā)展密切關(guān)系。病理性ERS可增強胰島B細胞免疫原性，該過程是否通過重塑B細胞MIP而新產(chǎn)生ERS相關(guān)自身抗原肽尚不清楚。

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來自陸軍軍醫(yī)大學、青島大學醫(yī)學院、濰坊醫(yī)學院的研究人員用20mM葡萄糖和傳統(tǒng)的ERS誘導劑Thapsigargin（TG）處理NOD小鼠來源的胰島B胞系NIT-1細胞，建立B細胞病理性ERS模型。利用高通量高分辨率液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)鑒定穩(wěn)態(tài)和ERS態(tài)胰島B細胞MIP，總共鑒定出747條H2-Kd限制性高可信肽段（FDR0.05），長度為8肽-11肽，其中以9肽居多，85%以上預(yù)測為H2-Kd高親和力結(jié)合汰（rank%<0.5）,氨基酸序列分析發(fā)現(xiàn)我們鑒定的高親和力9肽的定殘基主要是P2位上的酪氨酸和P9上的亮氨酸，符合經(jīng)典H2-Kd高親和力結(jié)合肽特征。

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通過比較穩(wěn)態(tài)和高糖G兩種不同條件誘導的ESR態(tài)B細胞MIP差異，篩選出兩種條件ERS同時誘生的胰島B細胞自身肽（不存在于穩(wěn)態(tài)B細胞MIP）作為研究對象，利用NOD小鼠驗證候選肽的免疫原性。ELISPOT實驗篩選出兩條H2-Kd限制性ERS誘生的B細胞自身肽SYT12291299和OTUB258_66能明顯刺激NOD小鼠脾CD8T細胞產(chǎn)生IFN-V,其中OTUB25866的刺激IFN-y能力和陽性反應(yīng)頻率甚至高于傳統(tǒng)的T1D主要自身肽GRP206-214。

進一步的研究證明這兩條ERS相關(guān)B細胞自身肽能明顯誘導小鼠脾CD8T細胞增殖和特異性殺傷效應(yīng)。因此，繼續(xù)深入研究新發(fā)現(xiàn)的ERS相關(guān)B細胞自身抗原肽在T1D發(fā)病中的作用及機制尤為重要，這些研究也將為深入闡明ERS促進T1D機制并探尋新的抗原特異性免疫干預(yù)靶點奠定基礎(chǔ)，對T1D的防治具有深遠意義。