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每日科研進(jìn)展 l 2023.07.05 l

2023-07-06 10:05 作者:RNA生物農(nóng)藥  | 我要投稿


果蠅X病毒樣顆粒DXV作為有效的dsRNA載體用于改進(jìn)果蠅的RNAi

RNA干擾(RNAi)已被開(kāi)發(fā)為一種有前途的害蟲(chóng)控制策略,其對(duì)于防控斑翅果蠅(SWD)具有巨大的潛力。

然而,由于通過(guò)取食攝入無(wú)保護(hù)的雙鏈RNA(dsRNA)在D. suzukii中誘導(dǎo)RNAi很差,因此建立dsRNA遞送的有效策略仍然是必要的。

在這項(xiàng)研究中,開(kāi)發(fā)了來(lái)源于果蠅X病毒(DXV)的新型病毒樣顆粒(VLPs),并研究了它們?cè)隗w外培養(yǎng)的昆蟲(chóng)細(xì)胞和體內(nèi)活的昆蟲(chóng)中遞送dsRNA的能力。

首先,DXV的多蛋白在C-末端與eGFP或Myc-tag融合,能夠以類(lèi)似于真實(shí)病毒體的球形自組裝成VLP。然后,通過(guò)拆卸/重組策略將dsRNA分子加載到DXV-VLPs中,并證明部分保護(hù)其免受D. suzukii體液中的降解。


圖 1. 在昆蟲(chóng)細(xì)胞中產(chǎn)生DXV-VLPs的重組桿狀病毒


圖 2. 蔗糖梯度超速離心純化Hi5細(xì)胞中的VLPs

此外,DXV-VLPs能夠?qū)sRNA有效地?cái)y帶到果蠅S2細(xì)胞和斑翅果蠅成蟲(chóng)中。通過(guò)靶向D. suzukii成蟲(chóng)中必需的vha26基因,與DXV-VLP::dsGFP和未保護(hù)的dsvha26(死亡率低于17%,無(wú)沉默)相比,DXV-VLP::dsvha26復(fù)合物可以誘導(dǎo)更高的死亡率(46%)和基因沉默(36%)。


圖 3.通過(guò)re-/dis組裝策略將dsRNA封裝到DXV-VLP中的效率


圖 4. 體內(nèi)實(shí)驗(yàn)分析DXV-VLPs作為dsRNA遞送載體到D.suzukii成蟲(chóng)中的能力

這項(xiàng)研究表明,基于昆蟲(chóng)病毒的VLP可以作為dsRNA遞送到昆蟲(chóng)中的納米載體,并為基礎(chǔ)研究和害蟲(chóng)防治提供改進(jìn)RNAi的工具。


原文鏈接:

https://doi.org/10.1007/s10340-023-01645-1


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