1. 收集培養(yǎng)的病毒：在HCMV病毒感染HFF細胞兩周左右，HFF細胞出現(xiàn)明顯的形態(tài)變化和裂解死亡。用細胞刮刀刮取大瓶底部的HFF細胞，并收集含有病毒的上清；

2. 反復(fù)凍融三次：37℃水浴鍋融30min，凍30min，融30min，凍30min，融30min，釋放HFF細胞內(nèi)的病毒顆粒；

3. 離心去掉細胞碎片：6000rcf 4℃ 10min離心，吸取上清，棄掉底部的細胞碎片；

4. 超離：用0.45uM的濾嘴過濾上清，去除可能污染的細菌（HCMV病毒顆粒直徑為120～200nm）。首先在超離管中加1ml 20％蔗糖，再加大約30ml的病毒上清，插冰上稱重、配平（誤差在0.05g以內(nèi)），貝克曼臺式超速離心機離心（離心程序20000rpm，1h30min，4℃）

   
   

5.重懸病毒：去掉上清，加500ul 5％蔗糖重懸，重懸液加入1.5ml的EP管，再分裝到PCR管，每管20ul，放入-80℃冰箱保存（防止反復(fù)凍融）。